بررسی ویروس پژمردگی لکه ای گوجه فرنگی (tswv) با استفاده از روش های سرولوژیکی و مولکولی در سطح استان خراسان رضوی

به منظوربررسی ویروس پژمردگی لکه ای گوجه فرنگی(tswv) در سال های زراعی 1387 و 1388 از مزارع استان خراسان رضوی ( شهرستان های مشهد ، نیشابور ، قوچان ، کاشمر ، تربت حیدریه ، فریمان ، رشتخوار ، تخت جلگه ) و گلخانه های گیاهان زینتی شهر مشهد ( گلخانه های توس گل و گلخانه دانشگاه فردوسی مشهد ) نمونه برداری انجام شد. تعداد 636 نمونه گوجه فرنگی و 135 نمونه از گیاهان زینتی جمع آوری شد. نمونه هایی که دارای علایم رنگ پریدگی ، بافت مردگی و لکه های حلقوی بودند جمع آوری شده و در شرایط خنک به آزمایشگاه انتقال داده شدند. در آزمایشگاه به منظور ارزیابی وجود ویروس در نمونه های مشکوک، آزمون سرولوژیکی tas-elisa انجام شد و نمونه های آلوده به ویروس که در آزمون الایزا مشخص شدند به 3 رقم توتون nicotiana rustica ، nicotiana clevelandii و nicotiana tabacum var samson مایه زنی گردیدند و پس از ظهور علائم با آزمون tas-elisa آزمایش شدند . در شناسایی مولکولی نمونه های آلوده به ویروس با استفاده از محلول (-plus)™rnx استخراج rna صورت گرفت و با استفاده از آغازگر اختصاصی در واکنش rt-pcr قطعه ای در محدوده باندی bp276 تکثیر گردید . نتایج حاصل از آزمون tas-elisa نشان می دهد که این ویروس فقط در شهرستان های مشهد ، تربت حیدریه ، تخت جلگه و رشتخوار وجود دارد و در سایر شهرستان های نمونه برداری شده آلودگی مشاهده نشد . tswv تنها در 18 نمونه گوجه فرنگی و 2 نمونه شمعدانی و 1 نمونه رز شناسایی شد . در آزمون مایه زنی مکانیکی ویروس مورد مطالعه تنها در توتون nicotiana tabacum var samson ( تغییر شکل برگ ها و ابلقی ) علائم مشخص بیماری را نشان داد .